大鼠原代食管上皮原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法:
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號(hào) | EY-XY3421 |
種屬來源 | 大鼠 | 組織來源 | 食管 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則 |
形態(tài):鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則
培養(yǎng)基:大鼠食管上皮細(xì)胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細(xì)胞基本屬性:
種屬來源:大鼠
組織來源:食管食管
生長特性:貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%胰蛋bai酶
產(chǎn)品貨期:5-6周左右
運(yùn)輸方式:T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制:僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹::大鼠食管上皮細(xì)胞采用鏈霉蛋bai酶-膠原酶聯(lián)合消化法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,大鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細(xì)胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮,耐摩擦,有保護(hù)作用。在食管與胃賁門交界處,復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。
原代細(xì)胞培養(yǎng)的主要步驟包括:
?一、剝離組織,去除外膜、結(jié)締組織等?:將組織從動(dòng)物體中取出,并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?:使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織,然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%~0.2%的消化?:將剪碎的組織塊加入含有0.1%~0.2%的緩沖液中,進(jìn)行消化。消化時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需求選擇熱消化(37℃)或冷消化(4℃),熱消化時(shí)間短,冷消化時(shí)間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后,過濾、計(jì)數(shù)?:將消化后的細(xì)胞吹打到一個(gè)離心管中,然后過濾、計(jì)數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?:將計(jì)數(shù)后的細(xì)胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因間序列(78bp)常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒 | B16/luc小鼠黑色素瘤帶熒光素酶 |
木瓜探針法PCR鑒定試劑盒 | SF767 (人腦瘤細(xì)胞) |
木瓜特定基因序列PCR檢測(cè)試劑盒 | Sf9 (昆蟲卵巢細(xì)胞) |
木蝴蝶探針法PCR鑒定試劑盒 | sf9昆蟲細(xì)胞 |
木霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | SGC-7901 (人胃癌細(xì)胞) |
木霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | SGC-7901 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 |
木霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | SGC7901/DDP (STR)人胃癌耐藥株 |
木霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | SGC-7901-GFP (人胃腺癌細(xì)胞(綠色熒光)) |
木霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) |
木鼠菌PCR檢測(cè)試劑盒 | SHEE人食管上皮細(xì)胞 |
木鼠菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | SGC-7901人胃癌細(xì)胞 |
木鼠菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | SH-10-TC胃癌 |
木薯源性成分探針法熒光定量 PCR 試劑盒 | 大鼠原代食管上皮原代細(xì)胞SH-10-TC細(xì)胞 |
木絲霉PCR檢測(cè)試劑盒 | SH-4細(xì)胞 |
木絲霉PCR檢測(cè)試劑盒 | SheepL1綿羊肺成纖維細(xì)胞 |