公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號(hào) |
類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN | 貼壁生長 | EY-X63694 |
細(xì)胞名稱 類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C6
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Liriodenine
CAS No.:475-75-2
中文名:鵝掌楸
分子式:C17H9NO3
胞膽 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(L1) 規(guī)格: 50mg
酞 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(L1) 規(guī)格: 500mg
訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(L10) 規(guī)格: 100mg
促卵泡生成素(FSH) 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白12(L12) 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支
長春 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白15(L15) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
喜樹 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白6(L6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
絡(luò)塞定 訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白8(L8) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
異綠原B;3,4二??鼘?訂購|咨詢 脂質(zhì)運(yùn)載蛋白9(L9) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
長春質(zhì) 訂購|咨詢 脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
柚皮素 訂購|咨詢 脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CETP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
洋川芎內(nèi)酯A 訂購|咨詢 脂肪分相關(guān)蛋白(ADRP) 規(guī)格: HPLC≥98%,50mg/支
細(xì)辛脂素 訂購|咨詢 脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
哈巴苷; 哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷 訂購|咨詢 脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
葒草苷; 葒草素 訂購|咨詢 脂肪細(xì)胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
司巴 訂購|咨詢 脂肪細(xì)胞膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
5O基維斯阿米苷 訂購|咨詢 脂肪酶H(LIPH) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
防己諾林;漢防已素 訂購|咨詢 脂肪酶I(LIPI) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
松蘿; 松羅 訂購|咨詢 脂肪酶J(LIPJ) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
phosphoANAPC1(Ser377) 細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Vardenafil hydrochloride trihydrate
Agrin 聚集蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Bestatin,Ubenimex
CENPT 著絲粒蛋白T抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bestatin,Ubenimex
RanGAP1 RAN GTPase酶激活蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml (3,4Dimethoxyphenyl)acetic acid
PRC1 胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml PD0325901
CDCREL/SEPT5 細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11249; Thelin
SEPT6 細(xì)胞分蛋白SEPT6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11250; Thelin
Septin 8 細(xì)胞分蛋白SEPT8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11251; Thelin
性橙II 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:OrangeⅡ 含量:BR,99%
性蛋白酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AcidicProtease 含量:生物技術(shù)級(jí),1u/mg
性鉻蘭K 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:ChromeBlueK 含量:FMP,35%
性黑2 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Nigrosinewatersoluble 含量:高純,99%
性紅101 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AzocarmineG 含量:BR
性紅27 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Amaranth 含量:高純,95%
性紅92 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PhloxineB 含量:超純
性藍(lán)147 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:XylenecyanoleFF 含量:BR,99%
性藍(lán)1 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Xyleneblue 含量:特純,98%
性鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Acidcalciumphosphate 含量:CP
類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKIN副結(jié)核陽性血清規(guī)格:4ml用途:檢驗(yàn)
硝鹽胨水培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹
AHM鑒別培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別
大腸桿菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:4種*2*5條用途:用于大腸桿菌的生化鑒定
鐵細(xì)菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于鐵細(xì)菌的分離培養(yǎng)
大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基(USP)顆粒規(guī)格:250g用途:用于藥品的無菌檢測
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。