公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大鼠耳蝠皮膚細(xì)胞;BMS2 | 貼壁生長 | EY-X63720 |
細(xì)胞名稱 大鼠耳蝠皮膚細(xì)胞;BMS2
形態(tài)特性: 成纖維樣細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞來源于一雄性大鼠耳蝠的皮膚組織。中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫于2004年建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Eriodictyol 7-O-methylglucuronide
CAS No.:133360-42-6
中文名:圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖醛甲酯
分子式:C22H22O12
去氧膽 訂購|咨詢 著絲粒蛋白E(CENPE) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
噻嗪苷 訂購|咨詢 著絲粒蛋白E(CENPE) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg/支
7O葡萄糖苷 訂購|咨詢 著絲粒蛋白F(CENPF) 規(guī)格: HPLC≥98% ;10mg/支
熊果苷ARBUTI 訂購|咨詢 著絲粒蛋白H(CENPH) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃連 訂購|咨詢 著絲粒蛋白H(CENPH) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
擬人參皂苷F11 訂購|咨詢 著絲粒蛋白I(CENPI) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
升3OαL拉伯糖苷 訂購|咨詢 羥基二酰合酶(HMGCS) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
大豆苷 訂購|咨詢 羥基膽素合酶(HMBS) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
4去氧基表鬼臼素 訂購|咨詢 羥基異構(gòu)酶(HYI) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
去斑蝥 訂購|咨詢 羥脯(Hyp) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
異歐前胡素 訂購|咨詢 羥基脫氫酶β(HADHβ) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
羽扇豆 訂購|咨詢 羥賴(Hyl) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
路路通 訂購|咨詢 羥酰水解酶(HAGH) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支
石榴甙;石榴苷 訂購|咨詢 羥氧酶1(HAO1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
桃葉珊瑚苷;杜仲苷 訂購|咨詢 羥氧酶2(HAO2) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃柏 訂購|咨詢 蓋膜蛋白α(TECTα) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
原花青素 訂購|咨詢 蓋膜蛋白β(TECTβ) 規(guī)格: UV≥95%,20mg/支
龍膽(堅(jiān)龍膽) 對照品 訂購|咨詢 粘脂蛋白1(MCOLN1) 規(guī)格: 0.5g
Aldolase A 醛縮酶A抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Piperine
Aldolase C 醛縮酶C抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Piperine
ALF/GTF2A1LF 通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Pneumocandin B0
ALK/CD246 間變型淋巴瘤激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Formoterol
CDC27/ANAPC3 后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Homatropine Methyl Bromide
CO4A2 膠原蛋白4a2亞基抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Abiraterone Acetate
REM/GTP binding protein REM1 GTP結(jié)合蛋白REM1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Brimonidine
Laminin 1+2 層粘連蛋白1+2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Asulam
基二甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Dimethylaminehydrochloride 含量:BR,98%
脲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Semicarbazidehydrochloride 含量:實(shí)習(xí)級,98%
吡啶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Pyridinehydrochloride 含量:AR,88%
吡哆辛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:VB6 含量:AR,80%
芐 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Benzamidinehydrochloride 含量:CP
酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:DLAlanineethylesterhydrochloride 含量:特純,99%
大觀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:SpectinomycinHCl 含量:14400~97400,粉末,6條帶
地 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Oxytetracyclinehydrochloride 含量:BR,95%
對二 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:1,4Phenylenediaminedihydrochloride 含量:超純,99%
對甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:4Methylanilinehydrochloride 含量:蛋白生物學(xué)級,10%
大鼠耳蝠皮膚細(xì)胞;BMS2蔗糖胰蛋白胨肉湯規(guī)格:250g用途:用于致病性嗜水氣單胞菌酶聯(lián)免疫試驗(yàn)
抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅵ規(guī)格:BR250g詳情介紹
SOB培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
甲磺去鐵胺規(guī)格:1g詳情介紹
cary-blair運(yùn)送培養(yǎng)基(液體)規(guī)格:10ml*20支用途:用于運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本
假單胞分離瓊脂規(guī)格:250g用途:用于假單胞菌群的測定
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。