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膽囊癌細胞;GBC-SDGBCSD
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  膽囊癌細胞;GBC-SDGBCSD的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

膽囊癌細胞;GBC-SD[GBCSD]

貼壁生長

EY-X63532

細胞名稱  膽囊癌細胞;GBC-SD[GBCSD]
形態(tài)特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: GBC-SD細胞株是王展明等2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。細胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形。分泌CEA和CA19-9。倍增時間大約為21.4小時。可移植到裸鼠。生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清,10%

傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。5天長滿。

傳代情況: PN

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Homo sapiens, human細胞名稱: 鼠源雜交瘤細胞;AV1F1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Bodo saliens Larsen and Patterson細胞名稱: 雜交瘤細胞14A3;11B6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Talaromyces luteus (Zukal) Benjamin, teleom ..細胞名稱: 抗T淋巴細胞單克隆抗體雜交瘤細胞;CD3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Mus musculus, mouse細胞名稱: 雜交瘤細胞;Bcsp31-1F1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-98-10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Cunninghamella echinulata var.elegans (L ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-290-3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-171-9 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

dried細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-145-9 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-200-23 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-200-23 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Candida albicans (Robin) Berkhout細胞名稱: 雜交瘤細胞;SU-211-10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

細胞名稱: 人肝癌細胞;CSQT-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Homo sapiens, human細胞名稱: 雜交瘤細胞;6A2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Pseudomonas sp.細胞名稱: 雜交瘤細胞;2C6A6 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Talaromyces thermophilus Stolk, teleomorph細胞名稱: 雜交瘤細胞;Jurkat-LTRGT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

Penicillium variabile Sopp, anamorph細胞名稱: 雜交瘤細胞;whiov-P24C-MoAb RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
膽囊癌細胞;GBC-SD[GBCSD]人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒PPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒PPELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人腎素(Renin)ELISA試劑盒PPIELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒P-PKCELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒P-PKCELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒P-PKCELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人高敏*狀腺原氨(u-T3)ELISA試劑盒PR3AbELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒PR3Ab-IgGELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 膽囊癌細胞 GBC-SD[GBCSD]
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