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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204
 
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產(chǎn)品名稱(chēng):
橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204相關(guān)產(chǎn)品:
鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)1,4-二巰基丁烷1,4-二溴丁烷
(標(biāo)準(zhǔn)品)1,4-雙(二苯膦基)丁烷1,4-雙(羥甲基)環(huán)己烷
  橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63230

細(xì)胞名稱(chēng)  橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204
形態(tài)特性: 上皮樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 在裸鼠中成瘤。

培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS

傳代方法: 1:6~1:10傳代;每周2~3次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株;L7912形態(tài)特性: 腹水型生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human CTLA-4 ELISA KIT

615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Mouse IL-33 ELISA KIT

小鼠肝癌瘤株;H22形態(tài)特性: 實(shí)體瘤、腹水瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Bovine IL-8 ELISA Kit

615小鼠前胃癌瘤株;Fc形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human BD-1 ELISA KIT

KM小鼠子瘤株;U14形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human MMP-3 ELISA KIT

KM小鼠子瘤株;U27形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Mouse CCL28 ELISA KIT

C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME(Me)形態(tài)特性: 實(shí)體瘤、腹水瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Mouse MIP-1-β ELISA KIT

Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Chicken IgA ELISA Kit

KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human α-Galactosidase A ELISA KIT

KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Mouse IL-27 ELISA KIT

T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human HGF ELISA KIT

615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株;L615形態(tài)特性: 實(shí)體瘤;腹水瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Bovine MMP-2/TIMP-1 Complex ELISA Kit

兔間變表皮鱗癌瘤株;VX2形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human prolactin(PRL) ELISA KIT

C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME(Me)形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human CALML5 ELISA KIT

小鼠肉瘤瘤株;S180形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human Flt-3 ELISA KIT

KM小鼠未分化神經(jīng)膠質(zhì)瘤瘤株;B22形態(tài)特性: 實(shí)體瘤生長(zhǎng)特性: 體內(nèi)生長(zhǎng)Human Total MMP-1 ELISA KIT
橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒AFAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒aFGF-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒aFGF-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)ELISA試劑盒AflatoxinELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒AFPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀(guān)察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀(guān)察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 橫紋肌肉瘤細(xì)胞 A-204
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卵巢癌細(xì)胞;Caov-4 
 
021-69985169
13611928337

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