ELISA試劑盒的主要原理
1、包被 抗原或者抗體能以物理性吸附于固相載體表面,可能原理是蛋白質(zhì)和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗體反應(yīng)等免疫活性;ELISA試劑盒
2、標(biāo)記 抗原或者抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特點(diǎn);
3、顯色 酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者抗體結(jié)合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計(jì)算抗原或者抗體的相對(duì)含量。
目前應(yīng)用zui多的免疫酶技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),如果要分類的話,它屬于異相固相酶免疫技術(shù)。所謂異相是指在檢測(cè)時(shí)不需要將酶標(biāo)記抗原抗體和游離抗原抗體分開,所謂固相就是指的ELISA的96孔板固相載體了。